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溶解多肽是非常復(fù)雜的事情,一般很難一下子確定合適的溶劑。
通常是先取一點(diǎn)試驗(yàn),在沒有確定合適的溶劑前千萬不要全部溶解。
下列方法有助于您選擇合適的溶劑:
(1) 判定多肽的電荷特定,設(shè)定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)和C端COOH為-1;
堿性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)及N端NH2為+1, 其它氨基酸的電荷為0。計算出將電荷數(shù)。
(2) 如果凈電荷數(shù)>0,多肽為堿性,用水溶解:如果不溶解或溶解性不大,
加入醋酸(10%以上);如果多肽還不能溶解,加入少量TFA(25ul)溶解,然后加入500ul水稀釋。
(3) 如果凈電荷數(shù)<0,多肽為酸性,用水溶解;如果不溶解或溶解性不大,
加入氨水(25ul)溶解,然后加入500ul水稀釋。
(4) 如果凈電荷數(shù)=0,多肽為中性,一般需要用有機(jī)溶劑如乙腈,甲醇或異丙醇,DMSO等溶解。
還有人建議需要尿素來溶解疏水性很大的多肽。
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